UHRF2的磷酸化修饰差异位点对细胞生物学功能的影响

作者：闫新可; 陈荣娟; 程凤娟; 段昌柱^*

来源：基因组学与应用生物学, 2020, 39(12): 5765-5772.

DOI：10.13417/j.gab.039.005765

• UHRF2
• 磷酸化修饰
• 亚定位
• 泛素化

肝细胞癌(HCC)是最常见的癌症之一。UHRF2是一种肿瘤抑制因子,在细胞周期,泛素-蛋白酶体系统和表观遗传中都起重要的作用。为了探究在肝癌细胞(HepG2)和正常肝细胞(L02)中UHRF2的磷酸化修饰差异位点,以及研究UHRF2的磷酸化修饰差异位点对其生物学功能的影响。我们通过LC-MS-MS技术检测到UHRF2的第643位丝氨酸(S643)和第683位丝氨酸(S683)中的磷酸化修饰水平在HepG2和L02细胞中差异显著;为了研究各磷酸化位点的对细胞生物学功能的影响,我们构建3种UHRF2磷酸化位点突变质粒,通过DNA测序技术检测突变质粒的序列,并通过WB技术检测到UHRF2磷酸化位点突变体在HepG2和L02细胞中能够正常表达;IF实验证明UHRF2的磷酸化位点突变不影响UHRF2在细胞中的亚定位;WB实验检测UHRF2突变体对H3K9ac,H3K14ac的表达有影响;体内泛素化实验结果表明UHRF2的磷酸化影响UHRF2的泛素化能力。本研究表明在正常肝细胞(L02)和肝癌细胞(HepG2)中,UHRF2存在磷酸化修饰差异位点,UHRF2的磷酸化位点不影响其自身的亚定位,但对其自身的泛素化能力,以及H3K9ac和H3K14ac的表达产生影响。

• 单位
  基础医学院; 重庆医科大学