申克孢子丝菌酵母相对人THP-1巨噬细胞样细胞p38MAPK激活及白细胞介素6表达的影响

作者：刘彩霞; 杜蕾蕾; 段志敏; 曾荣; 沈永年; 胡素泉; 刘维达; 陈青^*; 李岷^*

来源：中华皮肤科杂志, 2017, 50(08): 562-566.

DOI：10.3760/cma.j.issn.0412-4030.2017.08.004

• 孢子丝菌属
• 巨噬细胞
• 白细胞介素6
• p38丝裂原活化蛋白激酶类

目的探讨申克孢子丝菌酵母相对人急性单核细胞白血病细胞(THP-1)巨噬细胞样细胞p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)活化及白细胞介素6(IL-6)表达的影响。方法实时荧光定量反转录PCR分析申克孢子丝菌酵母相刺激THP-1巨噬细胞样细胞3、6 h后IL-6 mRNA表达水平变化, 酶联免疫吸附法检测刺激24 h后IL-6分泌量;Western印迹法分析2 × 106 CFU/ml申克孢子丝菌酵母相体外作用于THP-1巨噬细胞样细胞30 min和60 min后p38MAPK磷酸化水平的变化, 同时检测100 nmol/L地塞米松(p38MAPK抑制剂)预处理THP-1巨噬细胞样细胞30 min后p38MAPK磷酸化水平及IL-6 mRNA表达水平的变化。采用SPSS19.0统计软件, 进行多因素方差分析、单因素方差分析, 组间多重比较采用LSD检验。结果刺激THP-1巨噬细胞样细胞3 h后, 酵母相组、凝胶多糖组、空白对照组IL-6 mRNA表达水平分别为56.81 ± 7.36、26.69 ± 1.22、0.97 ± 0.05, 刺激6 h后分别为378.03 ± 16.67、276.24 ± 39.13、1.02 ± 0.04, 组间差异有统计学意义(F= 5 552.22, P < 0.001)。申克孢子丝菌酵母相刺激6 h后IL-6 mRNA表达高于刺激3 h后(q= 16.74, P < 0.001), 申克孢子丝菌酵母相与THP-1巨噬细胞样细胞共孵育24 h后, 酵母相组、凝胶多糖组及空白组细胞上清液中IL-6浓度分别为(59.96 ± 18.16)、(91.01 ± 17.27)、(5.50 ± 2.30)pg/L, 组间差异有统计学意义(F= 26.62, P < 0.01);酵母相组高于空白对照组(P < 0.01)。地塞米松处理后, 酵母相组IL-6 mRNA表达水平(4.46 ± 1.03)低于未用地塞米松处理组(493.52 ± 113.87, P < 0.001)。申克孢子丝菌酵母相作用THP-1巨噬细胞样细胞30、60 min后, 磷酸化p38MAPK蛋白相对表达量均高于空白对照组(P < 0.01)。地塞米松预处理THP-1巨噬细胞样细胞后, 磷酸化p38MAPK水平低于未用地塞米松处理组, 差异有统计学意义(q= 10.81, P < 0.01)。结论人THP-1巨噬细胞样细胞体外与申克孢子丝菌酵母相作用后, 通过激活p38MAPK信号通路促进IL-6表达。

• 单位
  北京协和医学院; 中国医学科学院; 江苏省血液中心