银杏叶提取物(EGb761)通过调控AMPK/KLF4途径抑制血管平滑肌细胞表型转化

作者：周静; 徐慧敏; 黄鑫涛; 孔永红; 张文才; 王永辉

来源：中国药学杂志, 2020, 55(08): 604-610.

• 动脉粥样硬化
• 血管平滑肌细胞
• EGb761
• 表型转化

目的探讨银杏叶提取物(EGb761)对血小板源生长因子(PDGF)诱导的血管平滑肌细胞(VSMCs)表型转化的影响及其机制。方法体外培养原代VSMCs,使用20 ng·mL-1的PDGF诱导VSMCs表型转化,采用MTT法和划痕实验检测不同浓度(1、10、100μg·mL-1) EGb761对VSMCs增殖和迁移的作用;采用免疫荧光和Western blot分别检测VSMCs肌丝排列情况和表型转化相关蛋白α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、calopnin、骨桥蛋白(OPN)以及AMPK/KLF4通路蛋白表达的改变。结果与对照组相比,PDGF诱导VSMCs增殖和迁移明显增强,而EGb761呈浓度依赖性抑制PDGF诱导的VSMCs增殖和迁移;与对照组相比,PDGF组细胞肌丝F-actin排列紊乱、荧光减弱;α-SMA、calponin表达减弱,而OPN表达增强; PDGF+EGb761组细胞肌丝F-actin排列较整齐、荧光较强;α-SMA、calponin表达增强,OPN表达减弱,且呈浓度依赖性。此外,与对照组相比,PDGF能明显诱导AMPK磷酸化水平增加和KLF4表达上调,EGb761呈浓度依赖性抑制AMPK/KLF4通路的激活。使用AMPK通路抑制剂compound C抑制AMPK/KLF4通路后,EGb761对PDGF介导的VSMCs表型转化的抑制作用得到加强;反之,使用AMPK通路激活剂AICAR激活AMPK/KLF4通路后,EGb761对介导的VSMCs表型转化的抑制作用得到逆转。结论 EGb761通过抑制APMK/KLF4通路拮抗PDGF诱导的VSMCs表型转化。

• 单位
  浙江大学医学院附属第二医院; 郑州大学第一附属医院; 驻马店市中心医院