人主动脉平滑肌细胞体外分离及培养

作者:王静; 李逸明; 刘丹; 宋海旭; 闫承慧; 田孝祥*
来源:临床军医杂志, 2021, 49(10): 1117-1126.
DOI:10.16680/j.1671-3826.2021.10.15

摘要

目的探讨人主动脉平滑肌细胞(HAoSMC)的体外分离及培养方法。方法人升主动脉组织取自在北部战区总医院接受外科主动脉置换手术的A型主动脉夹层患者。无菌条件下撕除主动脉内膜,获得中膜,将中膜剪成约2 mm长的组织块,用0.15%的Ⅱ型胶原酶消化组织块10 h,吹打后接种于6孔板中,显微镜下观察培养不同时间点的细胞形态特征,免疫荧光染色法检测平滑肌细胞标志物SMα-actin及SM 22α的表达。结果胶原酶消化法可成功将平滑肌细胞从主动脉中膜分离出来。分离出的细胞在培养第1天开始贴壁,第7天呈现典型长梭形,第14天基本融合。培养的细胞SMα-actin及SM 22α染色阳性。结论本研究采用酶消化法成功从主动脉夹层患者标本中分离并培养出HAoSMC,为进一步阐明主动脉疾病的发病机制奠定了基础。