摘要
目的 探讨lncRNA MBNL1-AS1对过氧化氢诱导的心肌细胞损伤的影响及分子机制。方法 将H9C2细胞分为Con组、过氧化氢(H2O2)组、H2O2+si-NC组、H2O2+si-MBNL1-AS1组、H2O2+miR-NC组、H2O2+miR-135a-5p组、H2O2+si-MBNL1-AS1+anti-miR-NC组、H2O2+si-MBNL1-AS1+anti-miR-135a-5p组;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测MBNL1-AS1和miR-135a-5p的表达水平;蛋白质印迹(Western blot)法检测KLF4蛋白表达;流式细胞术检测细胞凋亡;试剂盒检测SOD活性和MDA含量;双荧光素酶报告实验检测MBNL1-AS1与miR-135a-5p, miR-135a-5p与KLF4的靶向关系。结果 过氧化氢诱导的心肌细胞中MBNL1-AS1表达水平升高,miR-135a-5p表达水平降低,KLF4蛋白表达水平升高,细胞的凋亡率升高,MDA含量升高,SOD活性降低(P<0.05)。沉默MBNL1-AS1或过表达miR-135a-5p, miR-135a-5p表达水平升高,KLF4蛋白表达水平降低,心肌细胞的凋亡率降低,MDA含量降低,SOD活性升高(P<0.05)。MBNL1-AS1靶向调控miR-135a-5p, miR-135a-5p靶向调控KLF4。抑制miR-135a-5p可逆转沉默MBNL1-AS1对H2O2诱导的H9C2损伤的作用。结论 沉默MBNL1-AS1可能通过调控miR-135a-5p/KLF4抑制过氧化氢诱导的心肌细胞损伤。
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单位陕西省宝鸡市中心医院