Fam172a基因敲除小鼠的制备与基因型鉴定

作者：张一帆; 王建文; 杨琪; 郝晓花; 黄玉波; 魏红山

来源：中国肝脏病杂志(电子版), 2017, 9(02): 32-35.

• Fam172a
• 基因敲除
• 小鼠

目的建立稳定的Fam172a基因敲除C57/B6J小鼠模型,观察基因敲除对小鼠生长发育的影响以及该基因在小鼠体内的生物学的作用。方法采用基因打靶敲除技术,获得杂合子(Fam172a~(+/-))小鼠。将所得Fam172a~(+/-)小鼠饲养于屏障环境中杂交获得纯合子(Fam172a~(-/-))小鼠。利用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)技术对小鼠基因型进行鉴定,称量出生后20天、40天以及60天野生型(wild type,WT)小鼠及Fam172a~(-/-)小、鼠的体重。随机处死8周龄WT小鼠和Fam172a~(-/-)小鼠,取心、肝、脾、肺及肾组织,采用Western blot险测Fam172a基因的组织表达特异性。结果 PCR及Western blot结果均证明Fam172a基因在Fam172a~(-/-)小鼠体内完全删除。Farm172a~(-/-)小鼠与WT小鼠20天、40天以及60天体重的差异均有统计学意义(P均<0.05)。FAM172A蛋白在WT小鼠中的表达有组织特异性。Fam172a~(-/-)小鼠每胎产仔数略低于WT小鼠,差异无统计学意义(P>0.05)。各小鼠外观、行为和繁殖力无显著差异。结论 Fam172a基因敲除C57/B6J小鼠模型已成功构建,并繁育出足够数量的Fam172a~(-/-)小鼠进行下一步实验。Fam172a基因对小鼠体重和生长发育具有重要作用。

• 单位
  首都医科大学附属北京地坛医院; 北京大学