PRP通过NRF2/HO-1通路对LPS诱导的BV2小胶质细胞神经炎症的保护作用

作者：王应辉; 张娅; 王自林; 朱紫馨; 牟秋菊; 祝丽丽^*

来源：中国输血杂志, 2023, 36(01): 19-25.

DOI：10.13303/j.cjbt.issn.1004-549x.2023.01.005

• 富血小板血浆
• BV2小胶质细胞
• 神经炎症
• 氧化应激
• NRF2/HO-1信号通路

目的 探究富血小板血浆(platelet-rich plasma, PRP)对脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)诱导的BV2细胞炎症反应保护作用与机制。方法 BV2小胶质细胞分成正常对照组、10%PRP对照组、LPS组(LPS诱导)、3%PRP+LPS组(LPS诱导，3%PRP预处理)、5%PRP+LPS组(LPS诱导，5%PRP预处理)和10%PRP+LPS组(LPS诱导，10%PRP预处理),CCK-8测定BV2细胞增殖。共聚焦显微镜测定BV2细胞线粒体膜电位水平，荧光法检测ROS生成情况，Griess法测定NO水平。Western blot检测IL-6、TNF-α、BACH1、GPX4、NRF2和HO-1蛋白表达。此外，用HO-1抑制剂处理BV2小胶质细胞后实验分为正常对照组，LPS组，ZnPP+LPS组，10%PRP+LPS组，ZnPP+LPS+10%PRP,Western blot检测HO-1、IL-6和TNF-α蛋白表达。结果 与正常对照组相比，PRP促进BV2细胞增殖(P<0.01);LPS组线粒体膜电位下降，ROS生成增多，NO、IL-6、TNF-α、BACH1水平升高(P<0.01),而GPX4、NRF2、HO-1表达水平下降(P<0.01)。与LPS组相比，3%PRP+LPS组、5%PRP+LPS组、10%PRP+LPS组BV2细胞增殖活性升高，线粒体膜电位升高；ROS、NO、IL-6、TNF-α、BACH1水平降低(P<0.01);GPX4、NRF2、HO-1在不同浓度PRP(3%、5%、10%)组表达升高(P<0.01)。另外，使用HO-1抑制剂结果显示，与LPS组比较，ZnPP+LPS组IL-6和TNF-α表达增高；与10%PRP+LPS+ZnPP组比较，HO-1抑制剂能够逆转PRP对LPS诱导下BV2细胞IL-6和TNF-α表达的影响(P<0.01)。结论 PRP可以通过激活NRF2/HO-1信号通路来抑制LPS诱导的BV2小胶质细胞炎症反应。

• 单位
  黔南布依族苗族自治州人民医院; 贵州医科大学