miR-876-5p通过负反馈调节上皮-间质样转化在胃癌进展中的作用及机制研究

作者：崔琴; 赵翠娟; 屈振杰^*

来源：河北医学, 2023, 29(06): 881-887.

• 胃癌
• miR-876-5p
• 上皮-间质样转化
• 细胞外信号调节激酶信号通路

目的:探究miR-876-5p介导胃癌上皮-间质样转化(epithelial-mesenchymal transition, EMT)对胃癌进展的影响及机制。方法:通过实时荧光定量PCR法测定胃癌组织及癌旁正常组织内miR-876-5p表达差异；将胃癌细胞分为对照组、EMT组、miR-NC+EMT组、miR-876-5p+EMT组、miR-876-5p+EMT+异丙肾上腺素盐酸盐(isoproterenol hydrochloride, ISO)组，按照分组将miR-NC或miR-876-5p转染至胃癌细胞、5ng/mL转化生长因子-β(transforming growth factor-β1,TGF-β1)诱导24h以建立胃癌细胞EMT模型以及20μmoL/L细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated protein kinase, ERK)信号通路激活剂ISO处理胃癌细胞24 h;处理结束后，免疫荧光染色检测各组细胞E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)的表达，蛋白质免疫印迹(Western blot)测定各组细胞内E-cadherin、Vimentin、N-cadherin、锌指蛋白转录因子(Snail)、基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)及MMP-9蛋白表达，CCK-8法和EdU染色检测各组细胞增殖，Transwell小室法测定各组细胞迁移数目与侵袭数目，Western blot测定各组细胞内ERK信号通路相关蛋白表达。结果:胃癌组织中miR-876-5p相对表达量较癌旁正常组织下降(P<0.05);与EMT组比较，miR-876-5p+EMT组胃癌细胞E-cadherin荧光表达增强、Vimentin和N-cadherin荧光表达减弱，E-cadherin蛋白相对表达量上调而Vimentin、N-cadherin、Snail、MMP-2、MMP-9蛋白相对表达量均下调(P<0.05),细胞增殖活性和EdU阳性率降低(P<0.05),迁移数目与侵袭数目减少(P<0.05),p-ERK1/2蛋白相对表达量下调(P<0.05);而与miR-876-5p+EMT组比较，miR-876-5p+EMT+ISO组E-cadherin荧光表达减弱、Vimentin和N-cadherin荧光表达增强，E-cadherin蛋白相对表达量下调，Vimentin、N-cadherin、Snail、MMP-2、MMP-9蛋白相对表达量均上调(P<0.05),细胞增殖活性和EdU阳性率升高(P<0.05),迁移数目与侵袭数目增加(P<0.05),同时p-ERK1/2蛋白相对表达量上调(P<0.05)。结论:miR-876-5p通过调节胃癌细胞EMT进程进而影响肿瘤进展，该作用可能与抑制TGF-β1介导的ERK信号通路激活有关。

• 单位
  内蒙古包钢医院