可用于植物转化的RNAi载体构建方法

作者：娄玲玲; 郑唐春; 曲冠证; 李开隆

来源：安徽农业大学学报, 2012, (01): 120-123.

DOI：10.13610/j.cnki.1672-352x.2012.01.002

• RNAi
• 转基因
• 烟草 RNAi
• transgenic plant
• tobacco

利用PCR方法扩增杨树Poptr;CYCD1;1基因的一段内含子序列,并克隆到pROKⅡ载体中,以构建可用于植物特定基因表达干扰的RNAi载体。为了验证载体的效果,构建pCAMBIA-1303载体转化烟草,经检测,转基因烟草能过量表达外源GUS与GFP融合蛋白。把GUS及GFP片段序列连接于RNAi载体,并导入pCAMBIA-1303载体转化烟草。试验结果表明,GUS及GFP干扰序列的导入均能大大降低外源GUS与GFP融合基因的表达。结果说明构建的载体能有效干扰特定基因的表达。

• 单位
  东北林业大学; 林木遗传育种国家重点实验室