摘要
目的探讨维甲酸(RA)对高氧环境下原代培养的肺泡Ⅱ型上皮细胞(AECⅡ)损伤的保护机制。方法分离、纯化孕19 d的胎鼠肺组织,得到肺泡Ⅱ型上皮细胞进行细胞培养,待细胞生长至亚汇合(约占瓶底80%以上时)将细胞分为空气组、高氧组、高氧+RA组,其中高氧+RA组加入含有10-6mol/L的RA。空气组置于空气中培养;高氧组与高氧+RA组置于37℃、95%O2-5%CO2条件下培养24 h,用测氧仪检测培养皿中的氧浓度。采用流式细胞术(AnnexinV-PI双标记)检测AECⅡ凋亡,Western blot检测Wnt通路中β-catenin蛋白质的表达,PCR检测β-catenin基因的表达。结果高氧组暴露24 h,AnnexinV (+)PI(-)和AnnexinV(+)PI(+)标记的AECⅡ数较空气组及高氧+RA组均显著升高(P <0.01);与空气组比较,高氧组β-catenin蛋白质的表达显著降低,差异有统计学意义(P <0.01),与高氧组比较,高氧+RA组则上调高氧暴露β-catenin蛋白的表达(P <0.01)。结论高氧环境下可导致AECⅡ大量凋亡、坏死;RA通过上调β-catenin蛋白的表达,降低AECⅡ坏死、凋亡,从而对高氧肺损伤起到保护作用。
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