miR-221-3p靶向沉默PARP1对三阴乳腺癌细胞的化疗药物敏感性的影响

作者：马楠; 齐宝文; 徐蓉^*

来源：广东医学, 2023, 44(08): 925-933.

DOI：10.13820/j.cnki.gdyx.20224725

• 三阴乳腺癌
• miR-221-3p
• PARP1
• 化疗敏感性

目的 分析miR-221-3p通过PARP1调节三阴乳腺癌(TNBC)细胞化疗耐药的分子机制。方法 收集行肿瘤切除术的TNBC患者标本，通过实时荧光定量PCR和Western blot检测癌旁组织、TNBC组织、TNBC化疗耐药组织和TNBC化疗敏感组织中miR-221-3p及其PARP1表达，取对数期MDA-MB-231细胞，将添加0.1μg/mL ADM的培养基加入细胞内，培养获得耐药的MDA-MB-231/ADM细胞。miR-221-3p inhibitor与inhibitor NC分别转染MDA-MB-231/ADM细胞，CCK-8法检测细胞药物敏感性，流式细胞仪分析细胞凋亡率，Western blot实验分析肿瘤细胞内Bax、Caspase-3、Caspase-9和Bcl-2蛋白的表达情况。TargetScan数据库预测miR-221-3p的潜在靶点，双荧光素酶报告基因实验分析miR-221-3p与PARP1之间的关系，Western blot实验检测下调miR-221-3p表达后PARP1、BRD7蛋白表达情况。PARP1 siRNA与siRNA NC分别转染MDA-MB-231/ADM细胞，分别利用CCK-8、流式细胞仪和Western blot检测细胞药物敏感性和凋亡情况。最后分析上调miR-221-3p通过PARP1对MDA-MB-231/ADM细胞药物敏感性和凋亡的影响。结果 与癌旁组织相比，TNBC组织中miR-221-3p表达下调(P<0.01),PARP1表达上调(P<0.01);与TNBC化疗敏感组织相比，TNBC化疗耐药组织中miR-221-3p表达下调(P<0.01),PARP1表达上调(P<0.01)。下调了miR-221-3p表达抑制了MDA-MB-231/ADM细胞的药物敏感性，细胞凋亡率明显降低。miR-221-3p靶向PARP1,下调miR-221-3p促进了PARP1蛋白表达，而抑制了BRD7蛋白表达，PARP1 siRNA转染MDA-MB-231/ADM细胞后促进了BRD7蛋白表达和细胞凋亡，上调了细胞药物敏感性。而过表达miR-221-3p通过PARP1上调了细胞凋亡和药物敏感性。结论 miR-221-3p靶向沉默PARP1增加TNBC细胞对化疗药物的敏感性。

• 单位
  新疆维吾尔自治区人民医院