产β-半乳糖苷酶重组毕赤酵母的发酵条件优化

作者：段绪果; 孙晓军; 吴敬

来源：基因组学与应用生物学, 2014, 33(06): 1288-1293.

DOI：10.13417/j.gab.033.001288

• β-半乳糖苷酶
• 毕赤酵母
• 发酵条件优化
• 高密度发酵

β-半乳糖苷酶(EC 3.2.1.23),又名乳糖酶,是利用乳糖为底物制备低聚半乳糖的关键用酶。利用本研究室前期构建的产β-半乳糖苷酶F441Y重组毕赤酵母为菌种,在摇瓶和3 L发酵罐中对发酵条件进行了优化。优化后的的摇瓶发酵条件为:种龄为22 h,初始甲醇浓度为40 g/L,诱导温度26℃,每24 h添加10 g/L甲醇。该条件下诱导表达周期120 h,酶活可达到44.6 U/m L。在摇瓶发酵的基础上,在3 L罐优化了初始诱导菌体浓度。结果显示,当初始诱导菌体浓度(OD600)为200时,发酵液的β-半乳糖苷酶的活力为204.9 U/m L,约为摇瓶酶活水平的4.6倍。

• 单位
  工业生物技术教育部重点实验室; 生物工程学院; 江南大学; 食品科学与技术国家重点实验室