兔抗Cap43多克隆抗体制备和初步纯化

作者：何萍; 张斯; 尹元琴; 隋承光; 孟凡东; 王晓华; 张志强; 姜又红

来源：中国公共卫生, 2007, (03): 289-291.

• Cap43
• 半抗原
• 多克隆抗体
• 斑点ELISA
• 辛酸-硫酸铵

目的制备兔抗Cap43多克隆抗体。方法以30个氨基酸组成的多肽为半抗原与钥孔血蓝蛋白(mcKLH)通过碳化二亚胺(EDC)法化学偶联成完全抗原(多肽-mcKLH)免疫家兔;制备兔抗Cap4443多克隆抗体;斑点ELISA法检测抗体效价,经辛酸-硫酸铵法初步纯化抗体后,十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)电泳考马斯亮蓝检测其纯化后的纯度。结果经免疫11周得到兔抗Cap43多克隆体,抗体效价为1:500。结论采用EDC化学偶联半抗原和大分子载体蛋白mcKLH,使其成为同时具有免疫原性与免疫反应性的完全抗原,用其免疫家兔获得多克隆抗体。

• 单位
  中国医科大学附属第一医院; 哈尔滨市红十字中心医院