二氯乙酸对人尿路上皮细胞膀胱癌相关基因甲基化、转录和蛋白表达的影响

作者：齐慧颖; 郭新彪^*

来源：毒理学杂志, 2018, 32(05): 350-357.

DOI：10.16421/j.cnki.1002-3127.2018.05.002

• 二氯乙酸
• 甲基化
• c-myc
• APC
• SFRP1
• SFRP5
• SV-HUC-1细胞

目的探讨二氯乙酸对人尿路上皮SV-HUC-1细胞膀胱癌相关癌基因c-myc和抑癌基因APC、SFRP1、SFRP5甲基化、转录水平以及蛋白表达量的影响,为阐明其毒性机制提供科学依据。方法采用CCK-8法检测二氯乙酸对SV-HUC-1细胞的细胞毒性,确定不显著影响细胞存活率的浓度及处理时间。以1和2 mmol/L浓度二氯乙酸分别对SV-HUC-1细胞染毒24、48和72 h,采用甲基化特异性PCR(MSP)和real-time PCR对细胞中c-myc、APC、SFRP1和SFRP5基因的甲基化状态和mRNA表达量进行检测。以2 mmol/L浓度二氯乙酸对SV-HUC-1细胞染毒72 h,采用Western blot对c-myc蛋白进行蛋白表达量检测。结果二氯乙酸可使SV-HUC-1细胞中c-myc基因非甲基化程度升高,mRNA和蛋白表达量上升;可使APC、SFRP1和SFRP5基因甲基化程度升高,mRNA表达量下降。结论二氯乙酸可影响SV-HUC-1细胞癌基因c-myc和抑癌基因APC、SFRP1、SFRP5的甲基化和表达,提示其可能有一定的表观遗传毒性。

• 单位
  北京大学; 公共卫生学院