探讨穿心莲内酯对HIV-1感染辅助受体CXCR4启动子作用机制的研究

作者：冯龙^*; 郭文涛; 李志慧; 郑文锦; 耿宇轩

来源：病毒学报, 2022, 38(02): 363-370.

DOI：10.13242/j.cnki.bingduxuebao.003968

• 穿心莲内酯
• CXCR4
• 启动子
• HIV-1

穿心莲内酯具有明显的抗病毒作用，对HIV-1(Human immunodeficiency virus type 1)具有明显的抑制作用，本研究探讨了穿心莲内酯影响CXCR4启动子活性的作用机制。首先构建双荧光素酶报告基因载体pFireRlucCXCR4(C-X-C chemokine receptor 4)，并转染入人HEK293T细胞；利用CCK8法检测穿心莲内酯对人HEK293T细胞细胞毒性作用；双荧光素酶报告基因技术检测穿心莲内酯对CXCR4启动子活性的影响；MTT法检测穿心莲内酯对人T淋巴细胞Jurkat细胞活性影响；实时荧光定量PCR检测穿心莲内酯对人T淋巴细胞Jurkat细胞表面CXCR4 mRNA和蛋白表达的影响。PCR分别扩增了CXCR4启动子（777 bp）和Rluc(1 997 bp)表达单元，通过测序和酶切鉴定双荧光素酶报告基因载体插入正确；穿心莲内酯作用于转染pFireRluc-CXCR4HEK293T细胞，双荧光素酶结果显示：穿心莲内酯能够下调CXCR4启动子活性，差异具有显著性（P<0.05）。穿心莲内酯作用于人T淋巴细胞Jurkat细胞后，qPCR和Western Blot结果显示：Jurkat细胞表面CXCR4 mRNA和蛋白表达降低。因此，穿心莲内酯能够影响CXCR4启动子活性，具有潜在的抗HIV-1的作用。

• 单位
  河南中医药大学; 广东医科大学