miR-497对THP-1巨噬细胞NLRP1表达及胆固醇流出的影响

作者：罗清宇; 曾高峰; 黄斌; 陈孔; 秦英楠^*

来源：中国老年学杂志, 2022, 42(22): 5574-5579.

• miR-497
• 单核细胞白血病(THP)-1巨噬细胞
• 含有Pyrin结构域NLR家族蛋白(NLRP)1
• 胆固醇

目的 探讨miR-497对人单核细胞白血病(THP)-1巨噬细胞含有Pyrin结构域NLR家族蛋白(NLRP)1表达及胆固醇流出的影响。方法 THP-1巨噬细胞，经佛波酯及氧化型低密度脂蛋白(Ox-LDL)处理，转化为泡沫细胞。将miR-497 mimic转染入细胞内，采用油红O和Dil Ox-LDL染色检测细胞中的脂质积累和胆固醇流出情况，实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测NLRP1 mRNA表达水平，Western印迹检测NLRP1、CD36、白细胞介素(IL)-1β及IL-18蛋白水平及荧光素酶报告基因分析miR-497与NLRP1的直接作用。结果 油红O染色表明，miR-497 mimic转染后24 h,细胞中脂质储存显著下降(P<0.05)。利用Dil Ox-LDL来追踪Ox-LDL摄取，发现miR-497 mimic转染后24 h和48 h的胆固醇流出量显著高于对照组(P<0.05)。与对照组相比，miR-497 mimic转染显著降低了THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞的NLRP1蛋白表达(P<0.05),并且CD36和IL-1β、IL-18等促炎因子蛋白表达显著降低(P<0.05)。NLRP1用荧光素酶报告基因检测miR-497的靶基因，并且与对照组相比，miR-497 mimic可显著抑制NLRP1 mRNA表达(P<0.05)。结论 miR-497通过靶向抑制THP-1巨噬细胞NLRP1,促进胆固醇流出。

• 单位
  南华大学附属第二医院