摘要

目的通过观察加味四君子汤对免疫性血小板减少性紫癜(immune thrombocytopenic purpura, ITP)小鼠外周血血小板、血小板生成素(thermoplastic polyolefin, TPO)、血小板膜糖蛋白Ⅱb/Ⅲa(GP-Ⅱb/Ⅲa)的影响,明确加味四君子汤对ITP小鼠的干预作用;通过对外周血白细胞介素(IL)-6、IL-17、IL-22、IL-10、转化生长因子β(TGF-β)含量的影响及Th17/Treg细胞平衡的调节作用,探讨加味四君子汤对ITP小鼠的干预机制。方法选用SPF级BALB/C小白鼠作为受试对象,7~8周龄,体质量(20±2)g,雌雄各半,共计100只。豚鼠,体质量(300±30)g,共计10只。采用自身血小板腹腔注射的方法复制ITP模型小鼠,然后将小鼠随机分为6组:空白对照组、模型对照组、中药高剂量组、中药中剂量组、中药低剂量组、西药对照组。空白对照组小鼠不做处理;模型对照组小鼠经口灌胃生理盐水,0.17 mL/10 g体质量,每日1次,连续灌胃10 d;高中低剂量组及西药分别给予3种浓度的加味四君子汤水煎剂和醋酸泼尼松悬液经口灌胃,0.17 mL/10 g体质量,每日1次,连续灌胃10 d。干预结束后,采用五分类小动物血细胞分析仪检测各组小鼠血液常规,统计分析血小板计数和血小板平均体积;采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测各组小鼠血浆中TPO、IL-6、GP-Ⅱb/Ⅲa、IL-17、IL-22、IL-10、TGF-β的含量;采用流式细胞术检测各组小鼠PBMC中Th17/Treg细胞百分比。结果与空白对照组比较,其余各组小鼠外周血中血小板计数明显减少(P<0.01),外周血中TPO、血小板膜糖蛋白Ⅱb/Ⅲa、IL-10、TGF-β含量及Treg阳性细胞百分比显著降低(P<0.01),血小板平均体积、IL-17、IL-22含量及PBMC中Th17阳性细胞百分比显著升高(P<0.01),差异有统计学意义;与模型对照组比较,各干预组小鼠外周血中血小板计数、TPO、GP-Ⅱb/Ⅲa、IL-10、TGF-β含量及Treg阳性细胞百分比明显增多(P<0.05),血小板平均体积、IL-17、IL-22含量及PBMC中Th17阳性细胞百分比明显降低(P<0.05),差异有统计学意义,其中以中药高剂量组小鼠改变最为明显。结论加味四君子汤对ITP小鼠具有提高血小板计数、上调血浆TPO、GP-Ⅱb/Ⅲa含量的干预作用。加味四君子汤对ITP小鼠的干预作用可能是通过调节ITP小鼠外周血Th17/Treg细胞平衡实现的。

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