鸡肠炎沙门氏菌转座突变体库的构建及减毒菌株的筛选

作者：吕爽; 朱婷; 王秀梅; 刘慧芳; 司微; 于申业; 陈利苹; 刘思国

来源：中国预防兽医学报, 2013, (03): 210-213.

• 肠炎沙门氏菌
• 转座子
• 突变体库
• 减毒菌株 Salmonella enteritidis
• transposon
• mutagenesis library
• attenuated strains

为筛选减毒肠炎沙门氏菌(S.enteritidis)菌株,本研究以含有Mini-Tn5转座子的重组自杀质粒pUT对S.enteritidis SM6株进行转座诱变,利用双亲本滤膜杂交方法与供体菌E.coliβ2155进行接合转移,构建并优化接合转移体系,利用卡那抗性和DAP营养缺陷培养平板筛选法构建了SM6的随机转座突变体库。其中包含5个子库,共计获得364株突变体,经PCR鉴定表明转座子均插入SM6株的基因组中。通过Caco-2细胞侵袭试验筛选S.enteritidis侵袭力减弱并在细胞内增殖受到抑制的减毒突变株,经初筛及验证最终获得3株稳定减毒菌株,为进一步研究减毒菌株突变毒力基因的定位及...

• 单位
  兽医生物技术国家重点实验室; 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所