苹果酰基辅酶A结合蛋白4基因MpACBP4的克隆及功能鉴定

作者：文媛媛; 韩丽娜; 马宗桓; 张亚云; 余慧芳; 毛娟; 左存武; 陈佰鸿^*

来源：植物生理学报, 2020, 56(11): 2397-2407.

DOI：10.13592/j.cnki.ppj.2020.0201

• 苹果
• MpACBP4
• 转基因Micro-Tom番茄
• 干旱胁迫

为明确苹果(Malus pumila) MpACBP4基因在非生物胁迫中的功能,本研究从苹果砧木M26中克隆得到MpACBP4基因(GenBank No.MG878871.1)。该基因长度为2016bp,编码671个氨基酸,等电点为5.37。MpACBP4是非分泌蛋白,无信号肽,具有4个保守功能结构域, 5个KELCHβ折叠结构基序。将MpACBP4与其他9种植物中ACBP4蛋白的氨基酸序列进行比对,发现总体相似度达到81%以上,说明MpACBP4是高度保守的蛋白质。进化关系显示, MpACBP4蛋白与梨(Pyrus)的亲缘关系最近。qRT-PCR结果显示, MpACBP4基因在不同干旱(轻度、中度、重度)胁迫下均有响应。为进一步鉴定其功能,构建了MpACBP4基因的过表达载体,并通过农杆菌介导遗传转化法获得转基因Micro-Tom番茄,进行聚乙二醇6000 (PEG6000)胁迫处理。试验结果显示:转基因植株种子的萌芽率是野生型的56%,过氧化氢酶(CAT)活性是野生型的58%,相对电导率是野生型的1.3倍左右。以上结果说明苹果MpACBP4基因可能参与逆境胁迫响应。

• 单位
  甘肃农业大学