葡萄酒中桔青霉素快速检测间接竞争ELISA方法的建立

作者：王一; 宁茜; 张源; 姜宇航; 裴世春^*; 赵小旭; 赵钢

来源：中国酿造, 2022, 41(01): 226-231.

• 葡萄酒
• 桔青霉素
• 酶联免疫分析
• 全抗原

该研究利用桔青霉素(CIT)结构中的羧基、活泼氢和羟基分别与牛血清白蛋白(BSA)、卵清蛋白(OVA)和血蓝蛋白(KLH)进行偶联制备全抗原。经小鼠免疫,采用间接竞争酶联免疫吸附(IC-ELISA)法筛选出具有最佳竞争性反应的配对抗血清和包被抗原,并构建快速检测葡萄酒中CIT的IC-ELISA法。结果表明,最优抗血清为免疫CIT-KLH(H)的血清,包被抗原为CIT-BSA(H),基于此构建的IC-ELISA法的检测线性范围为0.1～100μg/L(R2=0.969 88),检测限为0.1μg/L,桔青霉素抗血清半数抑制浓度(IC50)值为9.8μg/L,抗血清对沙丁胺醇、莱克多巴胺、展青霉素和黄曲霉毒素B1无交叉反应性。该方法在葡萄酒中检测CIT的加标回收率为92.01%～119.33%,加标回收率试验结果的相对标准偏差(RSD)为2.35%～5.22%,体积分数14%的乙醇对IC-ELISA检测结果无显著性影响(P>0.05),表明可直接上样快速检测葡萄酒中残留的桔青霉素。

• 单位
  通化师范学院