摘要

采用酶交联聚集体技术(CLEAs)制备氨基酰化酶(EC 3.5.1.14)交联聚集体,优化了制备条件。90%(体积比)乙醇为沉淀剂,戊二醛和乙二醇二缩水甘油醚(EGDE)作为混合交联剂,以酶、戊二醛和EGDE的质量比为1.00∶0.75∶2.00,在30℃下交联12 h。制备所得氨基酰化酶CLEA酶活保留率为63.42%。氨基酰化酶经固定化后热稳定性得到增强,热失活过程由自由酶的一阶指数失活模型变为二阶指数失活模型,分子间亚基的结合力得到显著加强。自由酶在37℃下保存24 h后几乎损失了所有活力,而氨基酰化酶CLEA则保留了43%的酶活力,在57℃下保存24 h后仍有32%的酶活力保留。此外,...

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