摘要
目的探讨沉默细胞分裂周期相关基因(NUF2)对食管鳞癌细胞增殖及转移能力的影响以及其相关的分子机制。方法回顾性分析癌症基因组图谱(TCGA)数据库中食管癌患者原发病灶及其癌旁组织的NUF2基因表达差异, 采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法分析食管鳞癌细胞系的NUF2基因表达, 设计靶向NUF2基因的沉默RNA(siRNA)序列, 构建慢病毒载体, Celigo法、噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖, 荧光激活细胞分选法(FACS)法检测细胞凋亡, Transwell方法检测细胞迁移和侵袭能力, 蛋白质印迹法(Western blot)检测蛋白表达, 慢病毒转染过表达变化最明显的五个下游基因, 再检测细胞增殖、迁移和侵袭能力的变化。组间比较采用t检验。结果 MTT法表明, 沉默NUF2基因后细胞增殖低于对照组(0.33±0.01比0.55±0.07, t=25.90, P<0.01), Transwell法提示沉默NUF2基因后细胞迁移低于对照组(KYSE-150:9.00±1.67比36.00±4.84, t=35.53, P<0.01;TE-1:52±1.86比246.00±9.79, t=45.73, P<0.01), 沉默NUF2的食管癌细胞中、过表达SNAI1基因后, 增殖、迁移和侵袭能力又有所恢复。结论 NUF2基因在食管鳞癌中高表达, 沉默其表达能够通过下调SNAI1基因来抑制细胞增殖、迁移和侵袭。
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单位中国科学院大学; 浙江省肿瘤医院