Tet-on调控BMP-2基因表达的腺病毒载体构建

作者：温家宾; 肖裕华^*; 陈钢; 李宇旭; 龚飞鹏

来源：江西医药, 2020, 55(12): 1790-1793.

• 骨形态发生蛋白
• 腺病毒
• 骨质疏松性骨折

目的构建Tet-on调控BMP-2基因腺病毒载体,并对其相关指标进行鉴定,为骨质疏松性骨折的基因治疗提供新的方法。方法以含有目的基因的pDC315-BMP-2质粒为模板,将目的基因克隆至pAdenoX-Tet-On 3G Vector中,构建pAdenoBMP-2-Tet-On表达质粒。将构建的pAdenoBMP-2-Tet-On表达质粒转染Adeno-X 293细胞,完成腺病毒扩增,PCR鉴定扩增产物,并利用Adeno-X Rapid Titer Kit检测病毒滴度。结果酶切及PCR结果显示BMP-2被成功导入Tet-on腺病毒载体中,并成功转染Adeno-X 293细胞,包装及扩增后得到Tet-on调控BMP-2基因的腺病毒载体,滴度为1x1010ifu/ml。结论成功构建了Tet-on调控BMP-2基因的腺病毒载体。

• 单位
  江西省人民医院