泛素特异性肽酶22对肝癌细胞凋亡的影响及机制研究

作者：王福成; 元刚; 孙咏红; 聂芳

来源：胃肠病学和肝病学杂志, 2018, 27(06): 629-634.

• 肝癌
• USP22
• 细胞凋亡
• 细胞周期

目的探讨泛素特异性肽酶22(USP22)对肝癌细胞凋亡的影响及其可能的分子机制。方法采用RT-PCR和Western blotting分别检测人正常肝Chang liver细胞和人肝癌HepG2细胞中USP22 mRNA及蛋白表达。利用脂质体转染USP22-siRNA靶向沉默USP22基因,并采用RT-PCR和Western blotting检测其沉默效果;流式细胞仪检测USP22基因沉默对HepG2细胞周期和细胞凋亡的影响,Western blotting检测USP22基因沉默对HepG2细胞中活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Cleaved caspase-3)、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶9(Cleaved caspase-9)、细胞周期素D1(Cyclin D1)和细胞周期蛋白依赖性激酶2(CDK2)表达的影响。结果 USP22基因在人肝癌HepG2细胞中表达明显高于人正常肝Chang liver细胞(P<0.05);siRNA干扰HepG2细胞后,与对照组相比,干预组中USP22 mRNA和蛋白的表达均显著降低(P<0.05),而阴性组差异无统计学意义(P>0.05)。靶向沉默USP22基因后,与对照组相比,干扰组中G0/G1期细胞所占比例显著升高,S期和G2/M期细胞所占比例显著下降,细胞凋亡率明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05);阴性组与对照组间G0/G1期、S期、G2/M期细胞所占比例和细胞凋亡率相比,差异无统计学意义(P>0.05)。与对照组相比,干预组中Cleaved caspase-3、Cleaved caspase-9、Cyclin D1和CDK2蛋白的相对表达量均显著降低(P<0.05),阴性组与对照组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论 USP22基因沉默可诱导肝癌HepG2细胞凋亡,其作用机制可能与周期蛋白Cyclin D1、CDK2及凋亡蛋白Cleaved caspase-3、Cleaved caspase-9的表达下降有关。

• 单位
  大连市友谊医院; 上海交通大学医学院附属仁济医院; 中山大学附属第一医院