COL3A1对胃癌细胞增殖及侵袭影响的实验研究

作者：姜洪伟; 胡琦^*; 王举; 白钰灵; 套格苏; 李海军; 胡锦峰

来源：中国实验诊断学, 2022, 26(04): 580-585.

• Ⅲ型胶原α1链/COL3A1
• 胃癌
• 胶原基因

目的 研究COL3A1在胃癌细胞增殖、迁移及侵袭过程中的作用。方法 以靶向COL3A1的干扰慢病毒（3个靶点）及阴性对照慢病毒转染胃癌细胞株MGC803，嘌呤霉素筛选稳转细胞株。qRT-PCR验证转染后MGC803细胞中COL3A1的mRNA表达，筛选出2个转染效率最高的细胞株，再以Western blot法进一步检测转染后胃癌细胞中COL3A1的蛋白表达量。采用MTT、Transwell法检测COL3A1干扰组、对照组胃癌细胞增殖、侵袭、迁移表型，观察COL3A1敲减前后胃癌细胞生物学特性的变化。结果 （1）COL3A1的mRNA表达水平在胃癌细胞转染shRNA-COL3A1慢病毒后出现显著下降，其中抑制效果最好的是shRNA 1组（P<0.01）、shRNA 3组（P<0.001）；重新分组后行Western blot法，发现与NC组相比，shRNA 1组、shRNA 2组COL3A1蛋白表达均下降，其中shRNA 2组抑制效果更显著（P<0.01）;(2)MTT结果显示，shRNA-COL3A1慢病毒转染后48h胃癌细胞的生长被明显抑制，在各时间点吸收值均低于NC组（P<0.05），其中shRNA 2组最明显（P<0.0001）;(3)通过Transwell小室对shRNACOL3A1胃癌细胞迁移能力进行检测，发现shRNA-COL3A1转染后，shRNA 1组（P=0.0029）及shRNA 2组（P<0.0001）胃癌细胞的迁移能力显著降低，其中以shRNA 2组最为显著（P<0.0001）;(4)通过Transwell小室检测shRNA-COL3A1胃癌细胞侵袭能力，发现shRNA 1组（P=0.0046）及shRNA 2组（P=0.0002）胃癌细胞的侵袭能力均显著下降，其中shRNA 2组最为显著（P<0.001）。结论 敲减COL3Al基因可有效抑制胃癌细胞的增殖、侵袭及迁移，COL3Al在胃癌发生发展中发挥了重要作用。

• 单位
  内蒙古自治区人民医院