绒山羊表达红色荧光及转胰岛素样生长因子Ⅰ基因体细胞核移植胚胎的制备

作者：郭旭东; 杨东山; 奥旭东; 吴侠; 李光鹏; 王玲玲; 宝明涛; 雪莲; 旭日干

来源：中国科学C辑:生命科学 , 2008, (12): 1152-1159.

• 绒山羊
• 胰岛素样生长因子Ⅰ
• 毛囊
• 胎儿成纤维细胞
• 转基因
• 体细胞核移植

利用含有红色荧光和Neor基因双选择标记的IGF1毛囊特异表达载体pCDsR-KI转染绒山羊胎儿成纤维细胞,经G418筛选获得具有红色荧光的IGF1转基因细胞.核移植操作前,通过比较卵母细胞体外成熟培养不同时间的成熟率以及核与极体的距离,确定20h为绒山羊卵母细胞的最佳成熟时间.比较了不同激活方法和培养体系对孤雌胚激活效率和孤雌胚早期发育的影响,结果表明:IA23187+6-DMAP组的激活效率和囊胚率(88.7%&21.6%)均稍高于乙醇+6-DMAP组(86.4%&20.4%),但二组相应数据之间差异均不显著(P>0.05),选择前者作为转基因核移植胚的激活方案;SOFaa和CR1aa两种...

• 单位
  中国科学院; 内蒙古大学; 中国科学院广州生物医药与健康研究院