ILK调控PLK1的表达对膀胱癌细胞恶性生物学行为的影响

作者：高娟; 董兵卫; 李卓; 王云杰; 张渭波^*

来源：山西医科大学学报, 2020, 51(08): 739-743.

DOI：10.13753/j.issn.1007-6611.2020.08.001

• 整合素连接激酶
• polo样激酶1
• 膀胱癌
• 凋亡
• 迁移

目的探讨整合素连接激酶(integrin linked kinase,ILK)调控polo样激酶1(polo-like kinase 1,PLK1)的表达对膀胱癌细胞恶性生物学行为的影响。方法将构建好的针对ILK基因的过表达质粒在脂质体介导下稳定转染人膀胱癌5637细胞,并命名为5637/ILK组,同时设转染空质粒的5637细胞作为阴性对照,并命名为5637/NC组;运用Western blot分别检测5637/ILK和5637/NC组中ILK的表达。再将低表达PLK1的PLK1 siRNA质粒稳定转染过表达ILK的膀胱癌5637/ILK细胞,同时设未转染质粒的5637/ILK细胞为阴性对照,并将实验分为5637/ILK+PLK1 siRNA组和5637/ILK组。运用Western blot分别检测两组细胞中PLK1的表达; TUNEL细胞凋亡检测试剂盒检测两组细胞的凋亡;划痕实验检测两组细胞迁移能力;运用流式细胞仪检测两组细胞中活性氧(ROS)的含量。结果 Western blot结果显示,5637/ILK组ILK蛋白表达较5637/NC组明显增高(P <0.05); PLK1蛋白的表达在5637/ILK+PLK1 siRNA组明显低于5637/ILK组(P <0.05)。TUNEL检测细胞凋亡结果显示,与5637/ILK组相比,5637/ILK+PLK1 siRNA组细胞的凋亡发生率显著增加(18.65%±1.26%vs 66.38%±0.73%,P <0.05)。划痕实验结果显示,5637/ILK+PLK1 siRNA组细胞在24 h内迁移距离小于5637/ILK组[(953.73±95.24)μm vs(1 771.47±92.86)μm],差异具有统计学意义(P <0.05)。ROS实验显示,5637/ILK+PLK1 siRNA组细胞ROS荧光强度显著低于5637/ILK组,差异具有统计学意义(t=11.62,P <0.05)。结论下调PLK1的表达水平可使过表达ILK的膀胱癌5637/ILK细胞的凋亡明显增加,迁移能力显著降低,细胞内氧化应激状态减低,揭示ILK过表达所诱导的促癌效应很可能是通过对PLK1的激活作用来实现的。

• 单位
  西安医学院第一附属医院; 咸阳市中心医院