Amy-2启动子的克隆和活性鉴定

作者：周家华; 唐波; 刘训良; 丁帆; 何道伟; **; 余泽前; 杨德同

来源：江苏医药, 2009, 35(12): 1479-1482.

DOI：10.19460/j.cnki.0253-3685.2009.12.039

• 人胰腺淀粉酶基因2
• 胰腺癌

目的探讨人胰腺淀粉酶基因2(Amy-2)启动子在人胰腺组织特异性并验证其在胰腺细胞内的活性。方法运用荧光素酶报告载体构建胰腺组织特异性启动子Amy-2质粒,将其转染人胰腺癌细胞系SW1990、PANC-1、正常人胰腺导管上皮细胞(HPDE)、乳腺癌(MCF-7)、肺癌(A549),验证其在胰腺细胞内的活性和特异性。利用分子生物学技术,结合PBS185载体构建载体pAmy2-Cre;在运用基因转染方法将pAmy2-Cre的转染人胰腺癌细胞株Panc-1、BxPC-3,通过PCR、Western blot方法观察pAmy-2的组织特异性。结果成功构建pAmy-2-luc和pAmy-2-Cre载体,证明了Amy-2的启动子在相应细胞内的转录活性;Amy-2的启动子能很好的驱动Cre蛋白表达。结论Amy-2有较好的胰腺组织特异性和转录。

• 单位
  东南大学附属中大医院; 南京大学; 南京医科大学第一附属医院; 东南大学