乳腺癌细胞系HCC1937和MCF7在DNA损伤修复反应时功能的比较

作者：董超; 张凤梅; 赵锡鹏; 郭公社; 罗月; 凤志慧

来源：中华预防医学杂志, 2014, 48(09): 809-814.

DOI：10.3760/cma.j.issn.0253-9624.2014.09.013

• 乳腺肿瘤
• BRCA1蛋白质
• DNA损伤
• HCC1937
• MCF7

目的通过比较DNA损伤修复基因乳腺癌易感基因1(breast cancer susceptibility gene1,BRCA1)和抑癌基因p53在HCC1937和MCF7两种乳腺癌细胞系中的功能状态及对DNA损伤修复反应的应答特性,研究两种细胞系在功能上的差异。方法应用western-blotting法检测两种乳腺癌细胞系中BRCA1和p53蛋白的表达,并检测了经过10 Gy电离辐射下1、4、8 h后BRCA1蛋白在MCF7、HCC1937和HCC1937野生型BRCA1(HCC1937 wtBRCA1)细胞系中的表达水平。同时用免疫荧光法观察BRCA1蛋白在MCF7和HCC1937细胞系细胞内的分布和焦点形成情况,并对电离辐射下的BRCA1、Rad51蛋白的焦点形成百分比进行计算。进一步用流式细胞仪检测两种细胞系的细胞周期变化。结果MCF7细胞中野生型的BRCA1和p53主要分布于细胞核内,这两种蛋白对DNA损伤反应有应答。10 Gy 8 h照射条件下,MCF7细胞系中BRCA1蛋白焦点形成百分比较无电离辐射高[(59.40±3.66)%比(11.80±3.51)%,t=16.26,P<0.05];MCF7细胞系照射组中Rad51蛋白焦点形成百分比较无电离辐射高[(73.90±8.66)%比(16.70±3.76)%,t=10.49,P<0.05],照射组p53蛋白[(82.54±1.04)比(23.75±0.51),t=87.90,P<0.05]和p21蛋白[(90.95±1.13)比(50.19±0.89),t=49.11,P<0.05]表达水平均较无电离辐射高,细胞在G1期蓄积。与MCF7细胞相比,在HCC1937细胞中的BRCA1和p53都产生了变异,在细胞核内两种蛋白较少。10 Gy 8 h照射条件下HCC1937细胞中无BRCA1蛋白焦点形成、p53和p21几乎无诱导表达以及细胞在G1和G2-M期无明显的蓄积。当恢复野生型BRCA1在HCC1937细胞内表达后,10 Gy 8 h照射条件下Rad51蛋白焦点形成百分比较无电离辐射高[(61.70±4.03)%比(6.22±2.27)%,t=20.78,P<0.05],细胞在G2-M期的蓄积增多。结论乳腺癌细胞系HCC1937和MCF7在应答DNA损伤修复反应时具有不同的功能特性。

• 单位
  公共卫生学院; 山东大学