高通量筛选NMNAT1抑制剂及其肿瘤杀伤作用

作者：沙务嘎; 李隽

来源：基础医学与临床, 2022, (6): 933-939.

DOI：10.3969/j.issn.1001-6325.2022.06.013

• 烟酰胺单核苷酸腺苷转移酶1(NMNAT1)
• 蛋白纯化
• 高通量药物筛选
• 凋亡

目的 利用在大肠杆菌体系中诱导表达的人源NMNAT1蛋白筛选其抑制剂,寻找治疗肿瘤的新药物.方法 利用酶切连接体系将人源NMNAT1插入pET21b(+)载体,将重组质粒转化入大肠杆菌BL21(DE3)菌株过表达蛋白,对重组蛋白进行纯化,通过3段式酶联荧光法在2280种天然化合物中筛选具有抑制NMNAT1活性的化合物,并在细胞水平验证其对肿瘤细胞的杀伤效果.结果 纯化得到较高纯度和活性的人重组

• 单位
  北京协和医学院; 中国医学科学院基础医学研究所