云南省江城县苏岛库蠓形态学和分子生物学鉴定

作者:李钊; 付强; 白方; 张纳西; 徐勇; 元正菊; 何于雯; 王静林*
来源:中国国境卫生检疫杂志, 2018, 41(05): 324-328.
DOI:10.16408/j.1004-9770.2018.05.006

摘要

目的采用形态学和分子生物学方法对在云南省江城县采集的库蠓进行鉴定,明确该库蠓的准确分类。方法2017年9月在云南省江城县采集蠓虫样本,采用不损伤库蠓形态的方法提取基因组DNA,用COⅠ基因和ITS-1基因特异引物进行PCR扩增和序列测定,采用Clustal X、DNAStar和Mega 6.1等软件进行核苷酸同源性和系统进化分析。同时将库蠓虫体压片,在体视显微镜下进行形态学鉴定,并计算AR、HR、PR、CR和TR1、TR2、TR3等数值。结果在江城县采集15只库蠓,均具有两复眼相连接,小眼面间无柔毛,触角15节,第3、1115节分布有嗅觉器,翅面翅基、径中、径端、径5室、中4室各有1个淡斑,中1室、中2室分别有2个和3个淡斑,其中基淡斑大,向后延伸至臀室基部翅缘;腹部有2个发达受精囊不等大,PR=3.10±0.48,与苏岛库蠓PR值差异无统计学意义(t=1.79,P>0.05)。遗传进化分析显示,在ITS-1基因进化树上江城县采集的15只库蠓与苏岛库蠓位于同一分支内,核苷酸同源性在96.8%99.3%之间,而与其他库蠓核苷酸同源性均低于94.2%;在COⅠ基因进化树上15只库蠓形成一个独立进化簇,这15只库蠓核苷酸同源性在99.4%以上。结论 15只江城采集的库蠓均为苏岛库蠓,其种内变异较小。本研究增添了苏岛库蠓种类鉴定所需要ITS-1基因和COⅠ基因序列,为库蠓快速鉴定和遗传进化研究提供了序列信息。

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