摘要
目的探讨微小RNA(miR)-3142在宫颈癌HeLa细胞增殖、侵袭、凋亡和顺铂耐药中的作用及其机制。方法将体外培养的HeLa细胞分为空白组、阴性组、miR-3142模拟物(mimics)组和miR-3142抑制剂(inhibitor)组, 采用实时荧光定量PCR(qPCR)检测HeLa细胞中miR-3142表达水平, 噻唑蓝(MTT)法检测HeLa细胞增殖和顺铂耐药性, Transwell小室检测HeLa细胞侵袭, 流式细胞仪检测HeLa细胞凋亡情况, 双荧光素酶报告基因实验检测miR-3142与第10号染色体缺失的磷酸酶和张力蛋白同源物基因(PTEN)的靶向关系, 免疫印迹法(Western blot)检测HeLa细胞中PTEN蛋白表达情况。结果 miR-3142 mimics组细胞中miR-3142(11.47±2.15)表达水平、细胞增殖率[(127.36±11.08)%、(136.25±11.42)%、(145.75±12.35)%]和穿膜细胞数(108.75±8.06)及顺铂对各组细胞的半抑制浓度(IC50)值[(92.36±2.18)、(88.15±2.65)、(76.40±3.85)、68.58±3.85)μmol/L]均明显高于阴性组[(0.96±0.06)、(96.75±5.15)%、(95.48±7.73)%、(98.06±6.22)%、(49.85±4.35)、(85.27±1.05)、(76.33±1.72)、(49.95±2.05)、(34.52±2.88)], 而细胞凋亡率(2.12±0.23)%、细胞中PTEN(0.14±0.02)蛋白表达水平均明显低于阴性组[(10.65±1.13)%、(0.41±0.03)](P<0.05);miR-3142 inhibitor组细胞中miR-3142(0.12±0.01)表达水平、细胞增殖率[(70.13±4.22)%、(62.50±5.06)%、(45.52±3.26)%]和穿膜细胞数(24.36±1.12)及顺铂对细胞的IC50值[(68.52±0.36)、(54.75±0.68)、(26.63±1.26)、(11.44±1.75)]明显低于阴性组, 而细胞凋亡率(19.28±2.38)%、细胞中PTEN(1.06±0.09)蛋白表达水平明显高于阴性组(P<0.05)。结论 miR-3142可促进宫颈癌HeLa细胞增殖、侵袭和顺铂耐药性并抑制其凋亡, 其作用机制可能与靶向下调PTEN表达有关。
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