微小RNA-202-5p介导瞬时感受器电位离子通道蛋白V亚族2表达调节三阴性乳腺癌干细胞的自我更新能力的机制

作者：胡泽成; 张晶; 刘红光^*; 陈前奇; 胡鹏举

来源：中华实验外科杂志, 2019, 36(10): 1784-1787.

DOI：10.3760/cma.j.issn.1001-9030.2019.10.016

• 微小RNA-202-5p
• 瞬时感受器电位离子通道蛋白V亚族2
• 三阴性乳腺癌
• 干细胞
• 自我更新能力

目的 探讨微小RNA(miRNA,miR)-202-5p通过瞬时感受器电位离子通道蛋白V亚族2(TRPV2)调节三阴性乳腺癌(TNBC)干细胞的自我更新能力。方法 实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测干细胞中的miR-202-5p表达量。RT-qPCR和蛋白质印迹法(Western blot)检测TRPV2、雌激素相关受体β(Esrrb)、性别决定区Y框蛋白2(Sox2)、八聚体结合转录因子4(Oct4)、以及干细胞表面标志物CD133和CD13的mRNA以及蛋白质的表达。并进一步展开肿瘤干细胞特性获得实验。应用SPSS 21.0统计软件分析。结果 miR-202-5p在TNBC干细胞中低表达(1.00±0.17比0.58±0.20,t＝2.771,P<0.05)。miR-202-5p mimic＋shTRPV2处理后,Esrrb、Sox2、Oct4、CD133、CD13的mRNA[Esrrb (1.10±0.09)比(0.39±0.04),t＝22.800,P<0.05]、Sox2[(1.10±0.08)比(0.41±0.06),t＝21.820,P<0.05]、Oct4[(1.00±0.09)比(0.43±0.07),t＝15.810,P<0.05]、CD133[(1.01±0.09)比(0.41±0.07),t＝6.640,P<0.05]和CD13[(0.99±0.09)比(0.40±0.07),t＝16.360,P<0.05])和蛋白表达呈降低趋势,细胞成球能力[(1.03±0.06)比(0.43±0.05),t＝24.290,P<0.05]、克隆形成能力[(65.00±4.76)比(28.44±3.88),t＝18.830,P<0.05]、增殖能力[(18.43±1.88)比(9.02±1.22),t＝13.280,P<0.05]显著降低；而miR-202-5p inhibitor处理后Esrrb、Sox2、Oct4、CD133、CD13的mRNA(Esrrb[(1.11±0.08)比(2.11±0.16),t＝17.680,P<0.05]、Sox2[(1.09±0.06)比(2.15±0.10),t＝28.740,P<0.05]、Oct4[(0.98±0.07)比(2.09±0.19),t＝17.340,P<0.05]、CD133[(1.01±0.07)比(2.22±0.10),t＝31.350,P<0.05]和CD13[(0.94±0.05)比(2.32±0.11),t＝36.120,P<0.05])和蛋白表达增加,细胞成球能力[(1.47±0.09)比(1.83±0.10),t＝8.460,P<0.05]、克隆形成能力[(77.23±6.00)比(110.37±11.25),t＝8.220,P<0.05]、增殖能力[(20.42±2.04)比(30.68±2.82),t＝9.320,P<0.05]显著提升。结论 TNBC细胞中的miR-202-5p上调抑制TRPV2基因的表达,抑制TNBC干细胞自我更新能力的获得。

• 单位
  深圳大学; 南华大学附属第一医院