摘要
目的:研究人乳腺癌微环境中癌相关成纤维细胞(carcinoma-associated ibroblasts,CAFs)的增殖、黏附、迁移、侵袭和凝胶收缩能力。方法:首先通过蛋白质印迹法检测细胞中纤黏蛋白(ibronectin,FN)、α-平滑肌肌动蛋白(alpha-smooth-muscle actin,α-SMA)和成纤维细胞活化蛋白(ibroblast activation protein,FAP)的表达来鉴别验证原代分离培养的CAFs与正常成纤维细胞(normal ibroblasts,NFs)。然后采用罗氏xCellingence活细胞分析系统、细胞计数法和CCK-8(cell counting kit-8)法比较CAFs与NFs的增殖差异。再通过细胞黏附实验、罗氏xCellingence分析系统、Transwell小室侵袭实验和凝胶收缩实验分别比较CAFs与NFs细胞的黏附、迁移、侵袭和收缩的能力。结果:原代分离培养的人乳腺癌CAFs细胞和NFs细胞均生长状态良好,增殖活跃,生长曲线的线型及趋势均符合细胞生长特点,但CAFs细胞的增殖能力明显高于NFs细胞。与NFs细胞相比,CAFs细胞的黏附、迁移、侵袭和收缩能力均明显增强。结论:人乳腺癌微环境中的CAFs细胞与NFs细胞的增殖与迁移存在明显差异,与NFs细胞相比,CAFs细胞具有较强的增殖、黏附、迁移、侵袭和收缩能力。
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单位重庆医科大学附属第二医院; 重庆医科大学附属第一医院; 重庆医科大学