鲤gip克隆、序列分析及其基因表达的调节

作者:杨国坤; 徐双阳; 梁晓敏; 秦超彬; 张艳敏; 孟晓林; 聂国兴
来源:水产学报, 2021, 1-9.

摘要

为研究GIP(葡萄糖依赖性肠促胰岛素,glucose-dependent insulinotropic polypeptide)在鲤体内的生理功能,实验利用RT-PCR(reverse transcription-polymerase chain reaction)技术从鲤前肠克隆得到gip,对其进行生物信息学分析,并对其mRNA的表达进行检测。结果显示,鲤gip的开放阅读框(open reading frame,ORF)为324 bp,编码107个氨基酸。经过结构预测鲤Gip前体蛋白包括信号肽、N端结构域、Gip成熟肽和C端结构域。氨基酸序列比对及系统进化树分析结果显示,鲤Gip蛋白与斑马鱼Gip蛋白的亲缘关系最近。Real-time PCR结果显示,gip在鲤各个组织中均有表达,但在前肠和垂体组织表达量最高。葡萄糖灌喂实验结果表明,鲤的脑和前肠中gip的表达量在灌喂葡萄糖1和2 h后显著增加。在饥饿再投喂实验中,鲤前肠中gip的表达量在饥饿后显著降低,而再投喂后表达量显著升高。在饲养实验中,高糖和高脂均能显著增加鲤前肠中gip基因的表达量。本研究克隆了鲤gip,并且不同的营养状态可以调节其表达水平。研究结果可初步阐明Gip的生理功能,为探究Gip调节鱼类糖脂代谢的机制提供理论依据。