敲低lncRNA LINC01296调节PD-L1抑制鼻咽癌细胞免疫逃逸的机制研究

作者：李君^*; 叶方; 韩富光

来源：免疫学杂志, 2023, 39(10): 847-856.

DOI：10.13431/j.cnki.immunol.j.20230110

• 长链非编码RNA LINC01296
• 程序性死亡配体-1
• 鼻咽癌CNE-2Z细胞
• 免疫逃逸

目的 研究敲低长链非编码RNA(lncRNA)LINC01296调节程序性死亡配体-1(PD-L1)抑制鼻咽癌细胞免疫逃逸的机制。方法 分离培养人外周血淋巴细胞后与人鼻咽癌细胞CNE-2Z共培养，同时取C57BL/6小鼠皮下注射CNE-2Z细胞构建鼻咽癌移植瘤模型24只，均随机分为对照组、lncRNA LINC01296敲低组[转染lncRNA LINC01296小干扰RNA(siRNA)]、阴性对照组(转染lncRNA LINC01296 siRNA阴性对照和空载质粒)、lncRNA LINC01296敲低+PD-L1过表达组(转染lncRNA LINC01296 siRNA和PD-L1过表达质粒)，分组转染后，流式细胞术检测人外周血淋巴细胞中活化CD8+T细胞比例；细胞计数试剂盒-8法检测人外周血淋巴细胞对CNE-2Z细胞杀伤率；测量移植瘤小鼠肿瘤体积；免疫荧光染色检测移植瘤小鼠肿瘤组织CD8和PD-L1阳性表达；实时荧光PCR实验检测CNE-2Z细胞和肿瘤组织lncRNA LINC01296、PD-L1信使RNA(mRNA)表达；蛋白印迹实验检测CNE-2Z细胞和肿瘤组织PD-L1蛋白表达。结果 与对照组相比，lncRNA LINC01296敲低组人外周血淋巴细胞中活化CD8+T细胞比例及对CNE-2Z细胞杀伤率、肿瘤组织CD8阳性比例升高(P<0.05)，肿瘤体积、CNE-2Z细胞和肿瘤组织PD-L1阳性比例、CD8和PD-L1双阳性比例、lncRNA LINC01296、PD-L1 m RNA和蛋白表达降低(P<0.05)；阴性对照组各指标无明显变化(P>0.05)；过表达PD-L1可减弱敲低lncRNA LINC01296对CNE-2Z细胞和小鼠各指标的影响。结论 敲低lncRNA LINC01296可通过下调PD-L1而促进CD8+T细胞活化及浸润，减弱鼻咽癌细胞免疫逃逸，增强CD8+T细胞对其杀伤力。

• 单位
  海南西部中心医院; 儋州市人民医院