miR-21对缺氧/复氧损伤后大鼠肾小管上皮细胞的影响

作者：胡红林; 习小庆; 叶真逢; 黄雅为; 黄瑞祯

来源：山东医药, 2021, 61(31): 30-33.

• 微小RNA-21
• 缺氧/复氧损伤
• 肾小管上皮细胞
• 大鼠

目的探讨微小RNA-21(miR-21)对缺氧/复氧(H/R)损伤后大鼠肾小管上皮细胞(NRK-52E细胞)的影响。方法体外培养NRK-52E细胞,将其随机分为4组。miR-21激活剂(pre-miR-21)+H/R组、miR-21拮抗剂(antagomiR-21)+H/R组、模型组建立H/R损伤模型,正常组常规培养。pre-miR-21+H/R组、antagomiR-21+H/R组在缺氧处理前24 h分别加入终浓度均为30 nmol/L的pre-miR-21、antagomiR-21预处理。用CCK-8法检测细胞活力,用流式细胞术检测细胞凋亡能力,用RT-PCR检测细胞内miR-21、程序性细胞凋亡因子4(PDCD4)mRNA表达,用Western blotting法检测细胞内半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)蛋白表达,用化学比色法、终点比色法检测细胞抗氧化酶活性和总抗氧化能力,用ELISA法检测细胞培养上清液中炎症细胞因子。结果与正常组比较,模型组细胞活力低、凋亡率高、miR-21相对表达量高、PDCD4 mRNA相对表达量低、Caspase-3蛋白剪切片段P17相对表达量高、抗氧化酶活性和总抗氧化能力低、炎症细胞因子水平高(P均<0.05);与模型组比较,pre-miR-21+H/R组以上指标均改善(P均<0.05)。antagomiR-21+H/R组除miR-21相对表达量外其他指标与模型组比较差异无统计学意义(P均>0.05)。结论 miR-21可抑制H/R损伤后大鼠NRK-52E细胞凋亡,增加其抗氧化能力,并减轻炎症反应。

• 单位
  南昌大学第二附属医院