科研之友
微信
新浪微博
Facebook
分享链接
摘要
目的观察不同碘营养水平哺乳期大鼠乳腺组织促甲状腺激素受体(TSHR)、蛋白激酶A(PKA)、钠碘转运体(NIS)mRNA和蛋白的表达, 探讨促甲状腺激素(TSH)-THSR-环磷酸腺苷(cAMP)-PKA信号通路在哺乳期乳腺摄碘过程中的作用。方法采用成组设计, 按体质量(80～100 g)采用随机数字表法将110只雌性Wistar大鼠分为适碘(NI)组、重度低碘(SID)组、中度低碘(MID)组、中度高碘(MIE)组、重度高碘(SIE)组, 每组22只。另选取22只雄性Wistar大鼠, 喂养情况与NI组一致。饲养3个月时, 收集雌鼠24 h尿样, 并将雌鼠与雄鼠合笼(5 ∶ 1), 交配后, 每只雌鼠单独喂养, 在生育10 d时, 处死哺乳期大鼠取甲状腺、乳腺组织。采用砷铈催化分光光度法测定尿碘;HE染色观察甲状腺和乳腺组织形态学改变;实时荧光定量PCR(real-time PCR)法检测甲状腺和乳腺组织TSHR、PKA及NIS mRNA表达水平;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测乳腺组织TSHR、PKA、磷酸化PKA(p-PKA)及NIS蛋白表达水平。结果与NI组比较(162.59 μg/L), SID、MID组雌鼠尿碘中位数(3.16、6.36 μg/L)均较低, MIE、SIE组雌鼠尿碘中位数(2 356.27、11 507.29 μg/L)均较高(P均< 0.01)。HE染色可见, 不同摄碘水平对甲状腺滤泡产生不同的影响:NI组多为均匀的圆形或椭圆形滤泡;MID组小滤泡增多, 上皮细胞呈单层柱状或立方, 滤泡腔变小, 胶质减少;SID组滤泡变小, 上皮细胞呈柱状或高柱状, 滤泡腔内胶质减少或缺如;SIE、MIE组甲状腺滤泡出现多形性变化, 既有部分滤泡明显增大, 又有部分小滤泡增生。不同摄碘水平对乳腺大导管也产生不同的影响:与NI组相比, SID、MID组乳腺大导管周围的结缔组织呈明显的纤维化, 而MIE、SIE组纤维化明显减轻。real-time PCR结果显示, 不同碘营养水平哺乳期大鼠甲状腺组织TSHR、PKA、NIS mRNA表达水平比较, 差异均有统计学意义(F = 10.73、92.37、115.75, P均< 0.01);乳腺组织TSHR、PKA、NIS mRNA表达水平比较, 差异均有统计学意义(F = 40.25、39.63、14.92, P均< 0.05)。Western blot结果显示, 不同碘营养水平哺乳期大鼠乳腺组织TSHR、PKA、p-PKA、NIS蛋白表达水平比较, 差异均有统计学意义(F = 4.14、6.73、8.48、4.51, P均< 0.05), 其中MIE、SIE组TSHR蛋白表达水平均低于NI组(P均< 0.05);SID、MID组PKA蛋白表达水平均高于NI组(P均< 0.05);SID组p-PKA蛋白表达水平高于NI组, 但SIE组低于NI组(P均< 0.05);SID组NIS蛋白表达水平高于NI组(P < 0.05)。结论哺乳期大鼠高碘摄入时乳腺组织TSHR mRNA、蛋白表达水平均降低, 低碘摄入时PKA、NIS mRNA和蛋白表达水平均升高。哺乳期大鼠乳腺组织可能通过TSH-TSHR-cAMP-PKA信号通路参与调控碘的摄入, 从而对自身及子代产生保护作用。
- 单位
