应用不同载体探索环二肽合成酶AlbC的高效可溶性表达

作者：石雄飞; 袁思棋; 郑佳; 王洪; 李玲珊; 刘君^*

来源：酿酒科技, 2023, (07): 65-71.

DOI：10.13746/j.njkj.2023099

• 环二肽合成酶AlbC
• 载体
• 可溶性表达

AlbC是一种环二肽合成酶，可用于合成具有抗菌性和抗肿瘤性的环二肽及后续衍生物。近年来，AlbC的产物在白酒及其副产物黄水中被相继检出，对赋予白酒健康功能起着至关重要的作用。为实现albC基因的高效可溶性表达，本研究以实验室保藏的枯草芽孢杆菌Y1为模板克隆出albC基因，构建了pQE30-albC,pET28a-albC,pET28a-SUMO-albC,pGEX-6P-1-albC 4个重组质粒，并探究了不同诱导温度下每个重组质粒的诱导表达情况。结果表明：（1）pQE30-albC不表达或者表达量低；pET28a-albC正确表达，但表达量和可溶性表达量都较低，纯化后融合蛋白浓度为1.0 mg/L;pET28aSUMO-albC正确表达，且实现可溶性表达，纯化后融合蛋白浓度为30 mg/L，切除SUMO标签蛋白后浓度为22 mg/L;pGEX-6P-1-albC正确表达，且实现可溶性表达，纯化后融合蛋白浓度为44 mg/L，切除GST标签蛋白后浓度为34 mg/L;(2)拥有GST促溶标签的pGEX-6P-1载体是4组载体中达到albC基因可溶性表达水平最高的载体；（3）在4种载体中，albC基因最佳可溶性表达条件为：以pGEX-6P-1为载体，在20℃的诱导温度下诱导表达18 h；可成功实现albC基因的高效可溶性表达。

• 单位
  四川轻化工大学; 生物工程学院