HEPN1过表达慢病毒的构建及对人泌乳素型垂体瘤细胞的影响

作者：冯杰; 夏祥国; 陈礼刚; 陈锐; 江勇; 张彪; 宋志富

来源：东南大学学报(医学版), 2017, 36(03): 409-416.

• 肝细胞癌下调蛋白-1
• 慢病毒
• 垂体瘤

目的:构建肝细胞癌下调蛋白-1(HEPN1)过表达慢病毒,观察其对人泌乳素型垂体瘤细胞HPAs HEPN1、caspase-3、Bax和Bcl-2表达以及细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移的影响。方法:构建p CHD-HEPN1重组质粒,转染HEK293T细胞进行病毒包装,再感染HPAs细胞,实验分HEPN1组、空质粒组和空白组3组,采用荧光显微镜观察绿色荧光蛋白表达,逆转录聚合酶链反应和蛋白印迹法检测HEPN1、caspase-3、Bax和Bcl-2表达,噻唑蓝比色法、流式细胞术、细胞侵袭和划痕实验检测细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移。结果:HEPN1组和空质粒组感染效率分别为90.3%和92.5%。与空质粒组及空白组比较,HEPN1组HEPN1、caspase-3和Bax的mRNA表达上调(P<0.05),Bcl-2的mRNA表达下调(P<0.05);HEPN1、caspase-3和Bax蛋白表达上调(P<0.05),Bcl-2蛋白表达下调(P<0.05);细胞总凋亡率增加(P<0.05),穿膜细胞数目减少(P<0.05),细胞迁移距离缩短(P<0.05)。结论:HEPN1过表达慢病毒可上调HPAs细胞HEPN1、Bax和caspase-3表达,下调Bcl-2表达,抑制细胞增殖,促进其凋亡,降低其侵袭和迁移能力。

• 单位
  西南医科大学