脂多糖注射及盲肠结扎穿刺诱导脓毒血症肾损伤模型的对比研究

作者：李超; 石炳毅; 柏宏伟; 谢晓媚; 毛文娟; 刘炎忠; 解俊杰; 崔馨芳; 王爽; 药晨^*

来源：西北国防医学杂志, 2021, 42(04): 215-220.

DOI：10.16021/j.cnki.1007-8622.2021.04.003

• 急性肾损伤
• 雄性小鼠
• 脓毒血症
• 脂多糖
• 盲肠结扎穿刺
• 炎症因子

目的:对比脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)腹腔注射及盲肠结扎穿刺(cecum ligation and puncture,CLP)诱导脓毒血症肾损伤建模方法的肾脏损伤情况及炎症过程特点。方法:将48只8～10周龄C57BL/6雄性小鼠分为LPS组(n=16),磷酸盐缓冲溶液(phosphate buffer saline,PBS)组(n=8),CLP组(n=16)和假手术组(sham组,n=8)。LPS组根据小鼠体质量注射LPS溶液20mg/kg(浓度1mg/ml),PBS组注射等量PBS,CLP组在距结肠末端1cm行结扎术,并用21号针对穿两孔后关闭腹腔,sham组仅开腹暴露盲肠闭合腹腔。分别在建模后0h、6h、12h、24h、48h处死小鼠,比较观察期内各组小鼠肾功能指标、病理损伤及炎症指标变化。用免疫荧光染色观察肾小管上皮细胞的凋亡。结果:PBS组及sham组小鼠建模前后血清肌酐、尿素氮水平比较,差异无统计学意义(P>0.05);而LPS组和CLP组小鼠肌酐、尿素氮迅速升高,均在24h达峰值,分别与建模前比较,差异有统计学意义(均P<0.05),且48h后均逐渐恢复。肾脏病理检查提示,LPS组及CLP组均显示肾小管上皮细胞空泡形成明显增多,小管坏死及凋亡不明显,但炎症反应过程有显著差别,其中LPS组白介素6、肿瘤坏死因子等炎症因子水平较CLP组迅速升高,6h达到峰值后逐渐降低,且CLP组下降较LPS组缓慢。细胞凋亡染色显示LPS组和CLP组均存在局部凋亡,而PBS组和sham组均未见明显凋亡。结论:LPS腹腔注射及CLP均能成功建立脓毒血症肾损伤模型,其中LPS模型的全身性炎症反应剧烈,重复性好,而CLP模型更贴近临床败血症的炎症特点,在科研实践中可根据需要选择合适的模型。

• 单位
  滨州医学院; 解放军总医院; 北京大学