摘要
目的:考察天山堇菜总黄酮提取物抗炎和免疫调节作用。方法:采用脂多糖(LPS)诱导小鼠腹腔巨噬细胞RAW264.7炎症模型,Griess法检测NO分泌水平,DCFH探针法检测活性氧(ROS)的含量,ELISA法检测细胞因子TNF-α、IL-6、IL-1β的含量,以及采用酶学实验检测天山堇菜总黄酮对环氧酶(COX)以及5-脂氧酶(5-LO)的抑制活性来考察天山堇菜总黄酮的抗炎作用;通过MTS法及ELISA法检测天山堇菜总黄酮对静息期淋巴细胞的影响,对刀豆蛋白(ConA)、LPS分别诱导小鼠T、B淋巴细胞增殖,以及对T淋巴细胞分泌细胞因子IL-2、IL-6、IFN-γ的影响来考察天山堇菜总黄酮提取物的免疫调节作用。结果:在LPS诱导的RAW264.7炎症模型中,与空白对照组比较,LPS模型对照组NO、TNF-α、IL-6、IL-1β含量以及活性氧ROS水平显著升高(P<0.01),与LPS模型对照组比较,天山堇菜总黄酮在0.78μg/mL~12.5μg/mL均能明显降低LPS致RAW 264.7分泌炎症介质NO和促炎症因子TNF-α、IL-6、IL-1β的水平(P<0.05或P<0.01),在3.12μg/mL~12.5μg/mL可显著降低活性氧ROS水平(P<0.01);天山堇菜总黄酮对COX-1、COX-2具有显著的抑制活性,IC50分别为:13.5μg/mL, 0.73μg/mL,对5-LO也具有一定的抑制活性,其IC50为334.3μg/mL;此外,天山堇菜总黄酮在6.25μg/mL~50μg/mL能显著促进静息期脾淋巴细胞增殖(P<0.01)。在T、B淋巴细胞增殖实验中,与空白对照组比较,ConA模型对照组、LPS模型对照组分别能显著促进小鼠T、B淋巴细胞增殖(P<0.01),与模型对照组比较,天山堇菜总黄酮在6.25μg/mL~200μg/mL对ConA、LPS分别诱导的小鼠T、B淋巴细胞增殖具有明显拮抗作用(P<0.05或P<0.01),在12.5μg/mL~200μg/mL明显抑制T淋巴细胞分泌IL-2、IL-6、IFN-γ(P<0.05或P<0.01)。结论:天山堇菜总黄酮具有较好的抗炎活性并且具有双向免疫调节作用,其机制有待进一步研究。
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单位新疆维吾尔自治区药物研究所