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摘要
目的探讨慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者肺组织标本中自噬相关基因和蛋白的表达情况。方法标本取自45例因肺部占位性病变行肺叶切除术患者的肺组织,根据患者有无COPD,分为非COPD组(对照组,15例)和COPD组(30例);再根据COPD患者的肺功能,将COPD组分为轻度COPD组(12例)、中度COPD组(12例)、重度COPD组(6例)。采用免疫组织化学染色观察肺组织中自噬蛋白微管相关蛋白1轻链3(LC3)B的表达;采用Western印迹法和实时定量PCR检测肺组织标本中自噬相关基因Atg5、酵母自噬相关基因Atg6同系物(Beclin1),以及自噬相关基因Atg5、Beclin1、LC3B的蛋白表达。结果非COPD组的肺组织结构清晰,未见支气管、肺泡结构破坏,炎性细胞浸润等。COPD组的肺组织结构破坏明显,肺气肿形成,肺实质有肺泡管、肺泡腔扩大,上皮细胞脱落、坏死等。LC3B蛋白主要表达于肺上皮细胞细胞质中,可见清晰的棕黄色颗粒。与非COPD组相比,COPD组肺上皮细胞细胞质中棕黄色颗粒增多,染色强度增加。轻度COPD组、中度COPD组和重度COPD组的Beclin1 mRNA均显著高于非COPD组(P值分别<0.01、0.05),轻度COPD组和中度COPD组的Atg5 mRNA均显著高于非COPD组(P值分别<0.01、0.05),重度COPD组与非COPD组间Atg5 mRNA的差异无统计学意义(P>0.05)。中度COPD组的Beclin1 mRNA和Atg5 mRNA分别显著高于轻度COPD组和重度COPD组(P值均<0.01),轻度COPD组的Beclin1 mRNA和Atg5 mRNA分别显著高于重度COPD组(P值均<0.05)。轻度COPD组和中度COPD组的Atg5蛋白表达量均显著高于非COPD组(P值分别<0.01、0.05),重度COPD组与非COPD组间Atg5蛋白表达量的差异无统计学意义(P>0.05);轻度COPD组、中度COPD组和重度COPD组的Beclin1蛋白和LC3B蛋白表达量均显著高于非COPD组(P值分别<0.01、0.05)。中度COPD组的Beclin1、Atg5、LC3B蛋白表达量分别显著高于轻度COPD组和重度COPD组(P值分别<0.05、0.01),轻度COPD组的Beclin1、Atg5、LC3B蛋白表达量分别显著高于重度COPD组(P值均<0.05)。结论在COPD的进展过程中自噬相关基因和蛋白表达增多,提示可能与疾病的发展有关。
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单位上海交通大学医学院附属新华医院
