miR-200b在肝癌中靶向调控Bmi1基因的实验研究

作者：吴文睿; 孙红; 余先焕; 张锐; 施祥德; 朱满生; 许磊波; 吴卓

来源：岭南现代临床外科, 2015, 15(05): 533-537.

DOI：10.3969/j.issn.1009-976X.2015.05.002

• microRNA
• 肝癌
• Bmi1
• miR-200b

目的研究miR-200b在肝癌中对Bmi1的调控作用,并分析其结合位点。方法首先利用生物信息学软件预测人Bmi1 3′-UTR上mi R-200b可能的结合位点;然后构建Bmi1 3′-UTR野生型和突变型报告载体,应用双荧光素酶报告基因分析检测Bmi1 3′-UTR上mi R-200b的结合位点;最后利用real time PCR和Western blot在人肝癌细胞Hep G2中验证mi R-200b对Bmi1的调控作用。结果人Bmi1 3′-UTR上存在3个mi R-200b的潜在结合位点;双荧光素酶报告基因分析提示,转染mi R-200b-3p mimic后野生型组荧光素酶活性明显低于突变型组;real time PCR和Western blot结果提示在Hep G2细胞中过表达mi R-200b可明显下调Bmi1的表达。结论 mi R-200b在肝癌中可通过靶向结合Bmi1基因3′-UTR特异性调控Bmi1基因的表达。

• 单位
  广东药学院附属第一医院; 中山大学孙逸仙纪念医院