摘要
目的:观察L1210小鼠白血病细胞分泌的exosomes的抗肿瘤作用。方法:采用离心超滤和蔗糖密度梯度离心法分离L1210细胞释放的exosomes。固相免疫电镜法制备exosomes的H-2D,ICAM-1电镜标本,免疫印迹观察exosomes中HSP70的表达情况。exosomes免疫DBA/2小鼠,检测特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)活性;免疫后的小鼠以L1210肿瘤细胞攻击,观察免疫保护效果。结果:L1210细胞分泌的exosomes为直径介于50~100nm的膜性微囊,圆形或椭圆形。抗H-2D,ICAM-1抗体-胶体金免疫电镜标记,囊外膜可见点状、颗粒状电子致密物沉积。通过免疫印迹证明其表达HSP70。Exosomes免疫小鼠,可诱导产生针对L1210细胞的CTL反应;L1210的exosomes(2.5及5μg)免疫小鼠后,接种L1210肿瘤细胞,有明显的抵抗肿瘤生长作用。结论:L1210分泌的exosomes在同基因小鼠模型中可产生较强的保护性免疫力,exosomes疫苗可作为白血病等恶性肿瘤免疫治疗的候选疫苗。
-
单位第四军医大学; 西京医院