摘要

目的探讨转化生长因子β1(TGF–β1)对肺泡上皮细胞上皮–间质转化的影响及与钙蛋白酶的关系。方法体外培养人Ⅱ型肺泡上皮细胞来源的A549细胞株, 将传代培养的细胞分为空白对照组、TGF–β1处理组、TGF–β1+钙蛋白酶抑制剂处理组、钙蛋白酶抑制剂组, 给予相应处理后Western–blot和RT–PCR分别检测上皮细胞标志物E钙黏素和间质细胞标志物α–平滑肌肌动蛋白(α–SMA)及钙蛋白酶–1(Calpain–1)的表达。结果与空白对照组对比, TGF–β1组钙蛋白酶–1的mRNA表达及蛋白表达明显增高(P<0.01), E钙黏素的mRNA表达及蛋白表达均明显降低(P<0.01), α–SMA的mRNA表达及蛋白表达明显增高(P<0.01);加入钙蛋白酶抑制剂后再加入TGF–β1刺激, 相对于TGF–β1处理组, 钙蛋白酶–1的mRNA表达及蛋白表达明显降低(P<0.01), E钙黏素的mRNA表达及蛋白表达明显升高(P<0.05), α–SMA的mRNA表达水平及蛋白表达水平明显降低(P<0.01), 而与对照组比较, 钙蛋白酶–1、E钙黏素、α–SMA表达无明显差异(P>0.05);单加入钙蛋白酶抑制剂后, 与空白对照组比较, 钙蛋白酶–1、E钙黏素、α–SMA的mRNA表达及蛋白表达无明显差异(P>0.05)。结论 TGF–β1可以通上调钙蛋白酶的表达诱导A549细胞发生上皮–间质转化。

  • 单位
    武汉大学中南医院