猪圆环病毒3型Cap蛋白多肽合成及免疫原性分析

作者：贺会利; 冯世文; 李军; 胡帅; 禤雄标; 谢永平; 柳锋; 钟舒红; 庞彬辉; 潘艳^*

来源：黑龙江畜牧兽医, 2021, (23): 78-154.

DOI：10.13881/j.cnki.hljxmsy.2021.03.0202

• 猪圆环病毒3型
• Cap蛋白
• 多肽
• 抗体
• 免疫原性

为了筛选出具有较强免疫原性的猪圆环病毒3型(Porcine circovirus virus type 3,PCV-3)核衣壳(Cap)蛋白多肽,试验应用生物信息学技术,通过Garnier-Robson和Chou-Fasman两种方法分析PCV-3-Cap蛋白的二级结构,Kyte-Doolittle方法分析亲水性,Karplus-Schulz方法分析柔性,Emini方法分析表面可能性,Jameson-Wolf方法分析抗原性,经对该蛋白生物学特性进行综合分析设计合成PCV-3-Cap蛋白多肽,与钥孔血蓝蛋白(KLH)偶联后作为抗原免疫小鼠,测定免疫后小鼠抗体效价以及血清中免疫球蛋白IgG、IgA和细胞因子干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-4(IL-4)的含量。结果表明:PCV-3-Cap蛋白的α-螺旋位于1～29,59～72,77～83,133～142,181～189 aa等区域;β-折叠位于1～15,20～33,37～52,62～111,114～123,131～155,161～167,175～193,203～215 aa等区域;转角位于12～15,32～43,137～144,167～170,174～177 aa等区域;无规则卷曲位于10～12,53～75,113～130,156～159,169～178,202～204 aa等区域;0～46,115～145 aa区域的亲水指数较高;柔性结构主要位于9～21,122～133,152～162 aa等区域;7～30,32～45,54～62,119～148 aa这些区域暴露于蛋白质表面的可能性较大;6～46,121～151 aa区域的抗原指数较高,经综合分析筛选出2段抗原性较好的肽段,分别为30～45 aa(16K)和130～145 aa(17K);2条PCV-3-Cap蛋白多肽均在第4次免疫小鼠后抗体效价达到1∶6 400;四免后小鼠的免疫球蛋白IgG、IgA及细胞因子IFN-γ、IL-6、IL-4含量与对照组相比均显著提高(P<0.05)。说明筛选出的2个PCV-3-Cap蛋白多肽具有较好的抗原性。

• 单位
  广西壮族自治区兽医研究所; 广西农业职业技术学院