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摘要
目的 建立高效液相色谱-电化学检测法(HPLC-ECD)夏枯草指纹图谱，测定其体外抗氧化活性并进行谱效关系的研究。方法 样品经80%甲醇提取，采用XBridge BEH shield RP18色谱柱(3.0 mm×150 mm,2.5μm)为固定相，乙腈–柠檬酸缓冲溶液(50 mmol?L–1,pH 2.8)为流动相，梯度洗脱，体积流量为0.6 mL?min–1;ECD检测电压为600m V，柱温为40℃；通过DPPH自由基清除能力、ABTS自由基清除能力和铁离子还原能力评价其抗氧化活性，Folin-Ciocalteau法测定总酚含量，结合相似度评价对21批夏枯草进行质量分析，进一步采用灰色关联分析和偏最小二乘法回归分析对抗氧化谱效关系进行研究。结果 HPLC-ECD指纹图谱共标定19个共有峰，指认了其中的14个成分，21批样品相似度均>0.9；夏枯草具有较强的ABTS、DPPH自由基清除能力和铁离子还原能力。HPLC-ECD指纹图谱可以特异性体现样品中抗氧化成分的信息，且色谱图总峰面积同总酚含量、抗氧化活性之间呈显著线性相关。灰色关联分析结果表明19个共有峰与抗氧化活性的关联度>0.6，偏最小二乘法回归分析的结果表明迷迭香酸、咖啡酸、芦丁等化合物对抗氧化活性的贡献较大。结论 HPLC-ECD的指纹图谱结合体外抗氧化法可用于夏枯草的质量评价和抗氧化物质基础研究。
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单位基础医学院; 遵义医科大学
