RNA干扰技术用于survivin基因表达的研究

作者：沈波; 鞠桂芝; 刘扬

来源：吉林大学学报(医学版), 2006, 32(3): 357-359.

DOI：10.3969/j.issn.1671-587X.2006.03.001

• survivin
• RNA干扰
• 基因表达

目的:构建pSUPER-SVV表达载体,并在真核细胞中进行表达,验证survivin基因表达是否受到抑制.方法:设计特异性以survivin基因为靶序列的寡核苷酸序列,退火后将其连接于pSUPER.basic载体中,经测序鉴定插入序列的正确性.以脂质体转染方法将pSUPER-SVV干扰质粒转染人类宫颈癌(HeLa)细胞,应用流式细胞术和RT-PCR方法检测survivin基因的表达情况.结果:成功构建survivin的RNAi表达载体.该载体可以使HeLa细胞中survivin基因在mRNA转录水平明显降低,与转染空质粒组相比差异具有显著性(P＜0.05).利用流式细胞术检测蛋白表达水平,转染pSUPER-SVV组抑制率可达31.62%,与转染空质粒组相比差异具有显著性(P＜0.001).结论:成功构建干扰survivin基因表达的载体,转染HeLa细胞后survivin基因在mRNA转录水平、蛋白表达水平均受到明显抑制.

• 单位
  吉林大学; 公共卫生学院