大蒜胞外囊泡活性成分解析及其缓解小鼠结肠炎作用

作者：廖柳月; 朱珍珠; 杨倩; 刘琴

来源：食品科学, 2022, 1-13.

• 大蒜
• 胞外囊泡
• 活性成分
• 抗炎活性
• 结肠炎

目的：炎症性肠病（inflammatory bowel disease，IBD）严重威胁人体健康，合理饮食可预防IBD的发生。食性植物来源胞外囊泡结构与功能和外泌体类似，且具有维持肠道稳态的功能而备受关注。本文旨在解析大蒜胞外囊泡（garlic-derived extracellular nanovesicles， GENs）的活性成分并探究其对小鼠结肠炎的作用。方法：采用超速离心与蔗糖密度梯度离心法从蒜汁中分离纯化GENs，并对其形貌和结构进行表征。采用液相色谱与质谱联用对GENs进行脂质分析和蛋白质组学分析；采用RNA转录组测序技术进行miRNA序列鉴定和靶基因预测分析。构建Caco-2单层肠上皮细胞模型，脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）刺激后，通过荧光光谱测定细胞渗透表观系数；采用试剂盒法测定上清液中一氧化氮（nitric oxide，NO）含量；采用酶联免疫吸附测定法（enzyme-linked immunosorbent assay， ELISA）测定细胞上清液中白介素-6（interleukin-6，IL-6）、白介素-1β（interleukin-1β，IL-1β）、干扰素（interferon-γ，IFN-γ）和肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor-α，TNF-α）含量。C57BL/6J 小鼠口服给予GENs（20、100、500 mg/kg），评估GENs的毒性，考察GENs对3%葡聚糖硫酸钠（dextran sulphate sodium salt，DSS）诱导结肠炎小鼠的疾病活动指数（disease activity index，DAI）和结肠长度的影响；采用苏木精和伊红对结肠组织切片进行染色；采用ELISA和试剂盒法测定血清中IL-6、IFN-γ、TNF-α和NO的水平。结果：GENs为纳米级杯状囊泡，含有26种脂质、62种蛋白质和 317种小RNA（microRNA， miRNA），脂质中磷脂酰胆碱（phosphatidylcholine，PC）含量最高，预测出5种miRNAs可靶向编码人炎性细胞因子的基因。GENs能显著降低LPS引起Caco-2单层细胞的通透性损伤，抑制NO的产生，调节细胞因子IL-6、IFN-γ、TNF-α和IL-1β分泌水平。体内实验表明，GENs 无毒性；当GENs剂量为100 mg/kg时能显著降低小鼠DAI分值，改善...

• 单位
  食品科学与工程学院; 南京财经大学